科學(xué)家將抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁?xì)胞培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉，如圖是培育過(guò)程示意圖（質(zhì)粒上所標(biāo)BamHⅠ、HindⅢ、PritⅡ、EcoRⅠ、Kpnl為五種限制酶及其酶切位點(diǎn)）?；卮鹣铝袉?wèn)題。
（1）選用雙酶切割圖中質(zhì)粒時(shí)應(yīng)選擇的限制酶為 PitⅠ和EcoRⅠPitⅠ和EcoRⅠ。為了獲得大量的抗蟲(chóng)基因，采用 PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其中引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物3′端連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物3′端連接脫氧核苷酸。
（2）雙酶切后的質(zhì)粒和目的基因連接比一種限制酶切好的原因是 可以防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，也可以防止目的基因和質(zhì)粒的反向連接可以防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，也可以防止目的基因和質(zhì)粒的反向連接。
（3）圖示將基因表達(dá)載體導(dǎo)入棉花細(xì)胞的方法為 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法利用的原理是該菌侵染植物細(xì)胞后，能將T質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到侵染的細(xì)胞，并 將其整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上將其整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上。
（4）從分子水平上檢測(cè)抗蟲(chóng)基因是否在植物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的方法為 抗原—抗體雜交法抗原—抗體雜交法；從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因棉花植株培育是否成功的方法為 做抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)，觀察害蟲(chóng)是否死亡做抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)，觀察害蟲(chóng)是否死亡。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】PitⅠ和EcoRⅠ；PCR；使DNA聚合酶能夠從引物3′端連接脫氧核苷酸；可以防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，也可以防止目的基因和質(zhì)粒的反向連接；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；將其整合到植物細(xì)胞染色體的DNA上；抗原—抗體雜交法；做抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)，觀察害蟲(chóng)是否死亡
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/19 8:0:9組卷：3引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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