2020年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予Harvey J．Alter博士、Michael Houghton博士和 Charles M．Rice博士，以表彰他們對(duì)丙肝病毒的重要發(fā)現(xiàn)。丙肝病毒（HCV）是一種RNA病毒，人們將得到的HCV的多個(gè)抗原基因首尾相連，連接在同一調(diào)控組件下，可構(gòu)成HCV融合基因。經(jīng)基因工程產(chǎn)生出的HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗體檢測(cè)試劑?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）獲得融合基因，即以相關(guān)的RNA為模板合成cDNA然后拼接起來(lái)，這個(gè)過(guò)程需要的酶有

逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶

逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶

。其次要利用PCR技術(shù)擴(kuò)增融合基因，即先根據(jù)融合基因的核苷酸序列，設(shè)計(jì)并合成引物，若該融合基因的序列為（虛線處省略了部分核苷酸序列），則PCR設(shè)計(jì)應(yīng)選用的兩種引物的部分序列應(yīng)分別為：①5'—AACTAT—3'，②

5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）

5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）

。引物能與變性的融合基因單鏈結(jié)合，在

Taq酶

Taq酶

催化作用下延伸，如此循環(huán)多次。
（2）構(gòu)建表達(dá)載體，如圖所示，表達(dá)載體上除了標(biāo)注的DNA片段外，在融合基因上游還必須擁有

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

，其作用是

是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

（3）用含

硫酸卡那霉素

硫酸卡那霉素

的培養(yǎng)基篩選出能生長(zhǎng)的菌落。
（4）抗原蛋白是

HCV融合基因表達(dá)

HCV融合基因表達(dá)

的產(chǎn)物，將抗原蛋白注射到動(dòng)物體內(nèi)，通過(guò)

體液

體液

免疫過(guò)程產(chǎn)生抗體，可制作出第三代HCV抗體檢測(cè)試劑。