核移植是克隆動(dòng)物的重要手段，核供體細(xì)胞的分化狀態(tài)會(huì)影響體細(xì)胞核移植胚胎的發(fā)育效率，研究者利用克隆豬對(duì)其機(jī)制進(jìn)行了研究。
（1）克隆豬的培育過(guò)程如圖1，重構(gòu)細(xì)胞經(jīng)

有絲

有絲

分裂（卵裂期）發(fā)育至囊胚，可移植到丙豬子宮中?？寺∝i的誕生說(shuō)明體細(xì)胞的細(xì)胞核具有

全能性

全能性

，圖1克隆豬的表型不完全與甲豬一致，原因是

克隆豬的線粒體基因來(lái)自乙豬，表型也要受環(huán)境的影響

克隆豬的線粒體基因來(lái)自乙豬，表型也要受環(huán)境的影響

。

（2）豬骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞，豬胎兒成纖維細(xì)胞則是高度分化的體細(xì)胞。研究者比較了兩細(xì)胞內(nèi)RNA m⁶修飾（即RNA某位點(diǎn)的甲基化，可提高mRNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性）水平，以及細(xì)胞作為核供體時(shí)重構(gòu)胚的發(fā)育效率，結(jié)果如表。

核供體細(xì)胞		骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞	胎兒成纖維細(xì)胞
供體細(xì)胞內(nèi)RNAm6修飾水平		1.0	0.7
重構(gòu)胚的發(fā)育效率	發(fā)育至卵裂期的重構(gòu)胚占比	71.2%	55.3%
	發(fā)育至囊胚期的重構(gòu)胚占比	26.3%	15.9%

結(jié)果表明核供體細(xì)胞的分化程度越高，

RNA m6A修飾水平和重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低

RNA m6A修飾水平和重構(gòu)胚的發(fā)育效率越低

。
（3）M基因編碼的甲基轉(zhuǎn)移酶催化RNA的m⁶A修飾。比較骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和胎兒成纖維細(xì)胞的M基因上游序列的甲基化水平，結(jié)果如圖2。
基因上游序列存在

RNA聚合

RNA聚合

酶的結(jié)合位點(diǎn)，該酶可催化基因的轉(zhuǎn)錄。據(jù)圖2可知成纖維細(xì)胞M基因上游序列的甲基化程度

高于

高于

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。
欲設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證M基因上游序列的甲基化程度是導(dǎo)致不同供體細(xì)胞RNA m⁶A修飾水平差異的原因。思路如下：
實(shí)驗(yàn)組用DNA甲基化抑制劑處理骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，對(duì)照組不處理；檢測(cè)兩組的M基因上游序列甲基化水平。
請(qǐng)修正實(shí)驗(yàn)方案：

應(yīng)選擇豬胎兒成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，還應(yīng)檢測(cè)RNAm⁶A修飾水平

應(yīng)選擇豬胎兒成纖維細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料，還應(yīng)檢測(cè)RNAm⁶A修飾水平

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（4）進(jìn)一步研究表明，RNA m⁶A修飾水平高的供體細(xì)胞核移植胚胎中DNA損傷位點(diǎn)較少。綜合上述研究，推測(cè)豬胎兒成纖維細(xì)胞核移植胚胎發(fā)育能力較低的原因，梳理成如圖3。