巖藻糖基乳糖（FL）對嬰幼兒腸道菌群和免疫系統(tǒng)的發(fā)育很重要，可添加到嬰幼兒配方奶粉中。為提高FL產(chǎn)量，科研人員進行了相關研究。
（1）P基因和C基因表達的產(chǎn)物是催化巖藻糖和乳糖合成FL的關鍵酶。從相關細菌內提取總DNA，依據(jù)P基因和C基因部分堿基序列，通過 PCRPCR技術擴增得到P基因和C基因。據(jù)圖1分析，獲得的P基因應具備限制酶 限制酶NdeⅠ和XhoⅠ限制酶NdeⅠ和XhoⅠ的識別位點。
（2）將圖1構建的重組質粒導入感受態(tài)大腸桿菌，培養(yǎng)一段時間后，用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法將其接種到含有鏈霉素的固體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)獲得單菌落。挑取單菌落，提取DNA，分成兩組，每組分別與兩種限制酶混合后進行電泳，結果如圖2。實驗中將提取的DNA與限制酶混合并進行電泳的目的是 將大腸桿菌中的DNA分子進行切割后再將DNA片段分離，經(jīng)過與標準DNA片段（M）比較，判斷細胞中是否有目的基因將大腸桿菌中的DNA分子進行切割后再將DNA片段分離，經(jīng)過與標準DNA片段（M）比較，判斷細胞中是否有目的基因。
（3）將檢測后獲得的目的菌接種到液體培養(yǎng)基中，發(fā)酵獲得FL。為提高FL產(chǎn)量，在發(fā)酵過程中需要考慮的環(huán)境因素有 氧氣、溫度、pH氧氣、溫度、pH。
（4）為進一步提高FL的產(chǎn)量，對已獲得的大腸桿菌進行再改造。大腸桿菌中β-半乳糖苷酶參與次級代謝產(chǎn)物乳糖的分解過程，UDP-葡萄糖脂質載體轉移酶參與巖藻糖轉化為構成菌體莢膜的異多糖酸，兩種酶分別受Z基因和W基因控制合成。敲除Z基因獲得Z-菌株，敲除Z基因和W基因獲得Z-W-菌株，敲除基因對菌株的生長沒有顯著影響。實驗中測定了Z-菌株和Z-W-菌株的FL產(chǎn)量，結果如圖3。實驗結果顯示 敲除Z基因或敲除Z基因和W基因，能夠大幅提高FL產(chǎn)量敲除Z基因或敲除Z基因和W基因，能夠大幅提高FL產(chǎn)量，闡明圖3結果產(chǎn)生的原因是 敲除Z基因或者敲除Z基因和W基因后，乳糖分解被抑制，巖藻糖轉化為異多糖酸也被抑制，更多的巖藻糖和乳酸反應生成FL敲除Z基因或者敲除Z基因和W基因后，乳糖分解被抑制，巖藻糖轉化為異多糖酸也被抑制，更多的巖藻糖和乳酸反應生成FL。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；限制酶NdeⅠ和XhoⅠ；稀釋涂布平板；將大腸桿菌中的DNA分子進行切割后再將DNA片段分離，經(jīng)過與標準DNA片段（M）比較，判斷細胞中是否有目的基因；氧氣、溫度、pH；敲除Z基因或敲除Z基因和W基因，能夠大幅提高FL產(chǎn)量；敲除Z基因或者敲除Z基因和W基因后，乳糖分解被抑制，巖藻糖轉化為異多糖酸也被抑制，更多的巖藻糖和乳酸反應生成FL
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：2難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6