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圖甲為構建重組質粒過程中的三種備選質粒,其中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因。圖乙為培育轉AFPs基因(抗凍基因)番茄的示意圖,外源DNA和質粒上均標出了酶切位點及相關抗性基因,請回答下列問題。

(1)圖甲中通常選用質粒C構建重組質粒,不選用質粒A的原因是
質粒A中沒有標記基因
質粒A中沒有標記基因
;復制原點處A和T特別多,其分子機理是
氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結合,作為復制起點
氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結合,作為復制起點
,不選用質粒B構建重組質粒的原因是
質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復制原點
質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復制原點
。
(2)據圖乙分析,若成功構建重組質粒以利于篩選鑒定,應優(yōu)先選用的兩種限制酶分別是
BamHⅠ
BamHⅠ
HindⅢ
HindⅢ
切割目的基因和質粒,采用兩種限制酶的另一優(yōu)點是
避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化
避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化

(3)PCR技術的原理是
DNA半保留復制
DNA半保留復制
,通過PCR技術獲取目的基因時需設計
2
2
種引物,引物是一小段
能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸
能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸
。
(4)圖乙農桿菌中的質粒應含有T-DNA,其作用是
攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA
攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA
。若要獲得抗凍能力更強的抗凍番茄,可以對AFPs基因進行改造,最終得到相應的蛋白質,該過程需用到
蛋白質
蛋白質
工程。

【答案】質粒A中沒有標記基因;氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結合,作為復制起點;質粒B的復制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復制原點;BamHⅠ;HindⅢ;避免目的基因和質粒被切割后自身環(huán)化;DNA半保留復制;2;能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸;攜帶目的基因進入番茄細胞并整合到番茄細胞的染色體DNA;蛋白質
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/10 8:0:9組卷:0引用:1難度:0.5
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    (2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2難度:0.6
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