已知人類的某種遺傳病受基因a控制,基因純合時(shí)細(xì)胞內(nèi)缺乏相應(yīng)基因控制合成的蛋白質(zhì)而表現(xiàn)癥狀,為探究基因a不能表達(dá)是否與其啟動(dòng)子有關(guān),將基因a的啟動(dòng)子片段轉(zhuǎn)移到如圖所示的載體上,即插入熒光蛋白基因啟動(dòng)子的位置,然后將其導(dǎo)入小鼠細(xì)胞內(nèi),根據(jù)能否調(diào)控?zé)晒獾鞍谆虻谋磉_(dá),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。已知熒光蛋白基因表達(dá)后,在紫外線照射下動(dòng)物會(huì)發(fā)生熒光反應(yīng)?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:

(1)為將基因a的啟動(dòng)子片段連接到圖示載體上,科研人員選擇HindⅢ和EcoRⅠ兩種限制酶對基因a啟動(dòng)子片段和載體進(jìn)行切割,目的是 防止載體和啟動(dòng)子片段自身環(huán)化、實(shí)現(xiàn)(基因a)啟動(dòng)子片段的定向連接防止載體和啟動(dòng)子片段自身環(huán)化、實(shí)現(xiàn)(基因a)啟動(dòng)子片段的定向連接(答出兩點(diǎn))。在基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中還需要 DNA連接DNA連接酶的參與,該酶的作用是 將載體和啟動(dòng)子片段連接起來將載體和啟動(dòng)子片段連接起來。
(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體后利用 顯微注射顯微注射的方法將其導(dǎo)入小鼠的 受精卵受精卵中,將該細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎的過程中,需將培養(yǎng)皿置于含 95%的空氣和5%CO295%的空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(3)為了獲得多個(gè)具有同種遺傳物質(zhì)的小鼠,可對早期胚胎采取的具體操作是 選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行均等分割選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行均等分割,通過檢測 轉(zhuǎn)基因小鼠在紫外線照射下是否發(fā)生熒光反應(yīng)轉(zhuǎn)基因小鼠在紫外線照射下是否發(fā)生熒光反應(yīng)來確定基因a不能表達(dá)與啟動(dòng)子是否有關(guān)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】防止載體和啟動(dòng)子片段自身環(huán)化、實(shí)現(xiàn)(基因a)啟動(dòng)子片段的定向連接;DNA連接;將載體和啟動(dòng)子片段連接起來;顯微注射;受精卵;95%的空氣和5%CO2;選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行均等分割;轉(zhuǎn)基因小鼠在紫外線照射下是否發(fā)生熒光反應(yīng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/7/19 8:0:9組卷:2引用:2難度:0.6
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