枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強的枯草芽孢桿菌菌株（B菌），從中克隆得到了一種纖維素酶（C1酶）基因。將獲得的C1酶基因與高效表達載體（HT質粒）連接，再導入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強的工程菌。
（1）對克隆到的C1酶基因測序，與數據庫中的C1酶基因編碼序列相比有兩個堿基對不同，但兩者編碼出的蛋白的氨基酸序列相同，這是因為 密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變仍然編碼同一種氨基酸密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變仍然編碼同一種氨基酸。
（2）C1酶基因以B鏈為轉錄模板鏈，轉錄時mRNA自身的延伸方向為5′→3′。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質粒連接，克隆C1酶基因時在其兩端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位點。該基因內部沒有這兩種酶切位點。圖1中酶切位點1和2所對應的酶分別是 BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調換）BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調換）。酶切后的C1酶基因需要在 DNA連接酶DNA連接酶酶的作用下與HT質粒連接構建基因表達載體。一個基因表達載體的組成必須有啟動子、終止子、復制原點、目的基因目的基因、標記基因（抗性基因）標記基因（抗性基因）等。
（3）轉化形成工程菌的過程中，應先用 CaCl2CaCl2處理枯草芽孢桿菌，使其處于容易吸收周圍DNA的狀態(tài)。
（4）將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組，一組接種工程菌，對照組1不進行處理，對照組2進行相應處理。在相同條件下培養(yǎng)96小時，檢測培養(yǎng)基中纖維素的含量。圖2結果說明工程菌降解纖維素的能力最強，推測對照組2的處理應為 接種（等量）B菌接種（等量）B菌。
（5）預期該工程菌在處理廢棄物以保護環(huán)境方面可能的應用 降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物。（舉一例）
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變仍然編碼同一種氨基酸；BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調換）；DNA連接酶；目的基因；標記基因（抗性基因）；CaCl2；接種（等量）B菌；降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有，未經書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6