干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病，患者血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體特異性最強。如圖表示科研人員利用基因工程技術獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對小鼠進行免疫的過程。回答下列問題：
（1）利用RNA通過①過程獲得cDNA需要 逆轉錄逆轉錄酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護尾部不被降解。為了針對性獲得cDNA，應如何設計逆轉錄第一步時的DNA引物 用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物，設計引物的目的是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
（2）為確保與pET41a質粒定向連接，對逆轉錄得到的cDNA擴增時，應在相應引物的 5’5’（填“5'”或“3'”）端加上 BamHⅠ和XhoⅠBamHⅠ和XhoⅠ酶切位點。
（3）③過程用重組質粒轉染大腸桿菌時，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是 使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長出菌落后再利用無菌膜同位置轉移到添加 氯霉素氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集 能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素的培養(yǎng)基上生長的能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素的培養(yǎng)基上生長的菌落進一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到SSB蛋白。
（4）將改造后的大腸桿菌生產的SSB蛋白注入到小鼠體內是為了檢測該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實驗內容應為抽取小鼠血液 提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體。
【答案】逆轉錄；用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；5’；BamHⅠ和XhoⅠ；使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)；卡那霉素；氯霉素；能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含氯霉素的培養(yǎng)基上生長的；提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測其是否含有抗SSB的抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/4 8:0:8組卷：79引用：3難度：0.4
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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