CAR—T細胞療法是通過設(shè)計CAR基因,并導入癌癥患者的T細胞中,使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細胞,CAR-T細胞膜上的CAR蛋白與癌細胞表面抗原特異結(jié)合后,激活CAR-T細胞使其增殖、分化,從而實現(xiàn)對癌細胞的特異性殺傷和記憶,主要過程如下圖。

請回答:
(1)要獲取CAR基因,可采取PCR技術(shù)進行大量擴增,前提是 CAR基因序列已知CAR基因序列已知。
(2)連接形成pCDH—CAR上除了目的基因外,還有一些必須的部分,比如啟動子和終止子,其中啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別結(jié)合位點。
(3)完成過程②常用方法是 顯微注射顯微注射法。此外,還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中,將CAR基因整合到T細胞的 染色體DNA染色體DNA上。
(4)檢測CAR-T細胞中的CAR基因是否表達了所采用的方法是 抗原-抗體雜交技術(shù)抗原-抗體雜交技術(shù)。
(5)在將CAR-T細胞輸給病人進行治療之前,還需在實驗室內(nèi)進行細胞擴增培養(yǎng)。體外培養(yǎng)CAR-T細胞的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外,一般還需添加 動物血清動物血清等天然成分。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】CAR基因序列已知;RNA聚合酶;顯微注射;染色體DNA;抗原-抗體雜交技術(shù);動物血清
【解答】
【點評】
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