鹽脅迫對作物的生長和產量影響較大,培育耐鹽作物對鹽堿地的利用、修復具有重要意義。研究人員從作物甲獲得耐鹽基因NtGCN2并將其轉入水稻,開展耐鹽水稻育種研究,其流程如圖所示。圖中Ti質粒箭頭處表示限制酶的酶切位點,黑色區(qū)域表示完整的基因或序列;bar是除草劑抗性基因、Tetr是四環(huán)素抗性基因、Ampr是氨芐青霉素抗性基因,①~⑤表示過程?;卮鹣铝袉栴}:

(1)終止子位于基因的下游,其作用是 終止轉錄終止轉錄。過程①需選用兩種限制酶進行處理,這兩種限制酶是 SmaⅠ和BclⅠSmaⅠ和BclⅠ,除選用限制酶外,過程①還要用到 DNA連接DNA連接酶;將重組質粒轉入根瘤農桿菌后,可先后用添加了 四環(huán)素四環(huán)素、除草劑除草劑的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)根瘤農桿菌,以最終篩選出重組根瘤農桿菌。
(2)過程③將水稻愈傷組織和根瘤農桿菌共培養(yǎng),目的是 獲得含有目的基因(耐鹽基因)的水稻愈傷組織獲得含有目的基因(耐鹽基因)的水稻愈傷組織過程④可通過調整培養(yǎng)基中 生長素和細胞分裂素生長素和細胞分裂素的比例誘導愈傷組織生根、長芽,得到水稻幼苗,該過程依據的原理是植物細胞的 全能性全能性。
(3)根據標記基因的功能,篩選出成功轉入NtGCN2基因水稻的方法是 在添加四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)在添加四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng);根據目的基因的功能,篩選出成功轉入NtGCN2基因水稻的方法是 在鹽堿地中培養(yǎng)水稻,能在鹽堿地中正常生長的即為成功轉入NtGCN2基因的水稻在鹽堿地中培養(yǎng)水稻,能在鹽堿地中正常生長的即為成功轉入NtGCN2基因的水稻。
【考點】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】終止轉錄;SmaⅠ和BclⅠ;DNA連接;四環(huán)素;除草劑;獲得含有目的基因(耐鹽基因)的水稻愈傷組織;生長素和細胞分裂素;全能性;在添加四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng);在鹽堿地中培養(yǎng)水稻,能在鹽堿地中正常生長的即為成功轉入NtGCN2基因的水稻
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/18 8:0:9組卷:3難度:0.6
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