圖1為胰島素基因結(jié)構(gòu)，圖2為pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中EcoRⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ和HindⅢ為限制酶，箭頭或線段所指為位點對應酶切位點。研究人員欲用此質(zhì)粒構(gòu)建胰島素基因的表達載體，培育能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌。請回答下列相關(guān)問題：
（1）若要進行胰島素基因的擴增，常采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 加熱到90～95°C加熱到90～95°C。在PCR反應中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的原因是 Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活。
（2）若利用圖2中的質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體，應選擇的引物為 引物4和引物5引物4和引物5，在構(gòu)建基因表達載體時，選擇 BamHI和HindⅢBamHI和HindⅢ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和運載體的正確連接效率。其中啟動子的作用是 提供RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄提供RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄。相對于采用重組大腸桿菌生產(chǎn)胰島素，采用酵母菌作為受體細胞的優(yōu)勢是 酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對蛋白質(zhì)進行加工和修飾酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對蛋白質(zhì)進行加工和修飾。
（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將胰島素B28位脯氨酸替換為天冬氨酸或者將它與B29位的賴氨酸交換位置，就可研發(fā)出速效胰島素類似物。研發(fā)速效胰島素類似物利用的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA雙鏈復制；加熱到90～95°C；Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活；引物4和引物5；BamHI和HindⅢ；提供RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點；驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；酵母菌含有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可對蛋白質(zhì)進行加工和修飾；蛋白質(zhì)工程
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6