為推進(jìn)“抗原篩查、核酸診斷”監(jiān)測(cè)模式,在核酸檢測(cè)基礎(chǔ)上增加抗原檢測(cè),科學(xué)家設(shè)計(jì)出一種新冠抗原自檢試劑盒,檢測(cè)原理如圖所示。

注:膠體金:一種常用標(biāo)記,可與蛋白質(zhì)牢固結(jié)合,大量聚集時(shí)肉眼可見(jiàn)紅色樣品墊:滴加樣品的位置
結(jié)合墊:預(yù)留可移動(dòng)的膠體金標(biāo)記的新冠抗體1、膠體金標(biāo)記的鼠IgG
T線:固定了新冠抗體2
C線:固定了抗鼠IgG抗體
(1)將鼻咽拭子樣品加入樣品墊,然后加入液體介質(zhì),利用紙層析方法,溶有樣品的液體沿試紙向吸水墊的方向擴(kuò)散。T線可以通過(guò)抗體2結(jié)合 抗原﹣抗體1抗原﹣抗體1復(fù)合物,使膠體金聚集在T線,顯示紅色條帶。
(2)為獲得T線上的抗體,需將 新冠病毒抗原新冠病毒抗原注入小鼠體內(nèi),取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)選擇后用96孔板培養(yǎng)和篩選,每個(gè)孔中接種 11個(gè)細(xì)胞,培養(yǎng)后經(jīng)抗體檢驗(yàn),再克隆 陽(yáng)性陽(yáng)性細(xì)胞(填“陽(yáng)性”或“陰性”)。
(3)若檢測(cè)結(jié)果為T線無(wú)紅色條帶,C線有紅色條帶T線無(wú)紅色條帶,C線有紅色條帶,則說(shuō)明該樣品中沒(méi)有新冠病毒抗原。
(4)下表是SARS﹣CoV-2核酸檢測(cè)時(shí)PCR儀參數(shù)設(shè)定要求:
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán) |
a、病毒cDNA合成 | 50℃ | 15min | 1 |
b、預(yù)變性 | 95℃ | 5min | 1 |
C、變性 | 95℃ | 5s | 45 |
d、? | 60℃ | 40s |
保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA
保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA
。②步驟d的主要包括PCR過(guò)程的
復(fù)性
復(fù)性
階段,預(yù)變性的目的是:使DNA充分變性,以便引物更好地和模板結(jié)合
使DNA充分變性,以便引物更好地和模板結(jié)合
。(5)臨床上,將癥狀及影像學(xué)結(jié)果高度疑似、核酸多次檢測(cè)為“陰性”的現(xiàn)象稱為檢測(cè)結(jié)果“假陰性”,導(dǎo)致“假陰性”結(jié)果可能是由于
①②③⑤
①②③⑤
(填序號(hào))。①檢測(cè)者處于感染初期
②檢測(cè)者感染時(shí)間較長(zhǎng)
③樣本采集位置不規(guī)范
④樣品稀釋度不足
⑤病毒出現(xiàn)變異
【考點(diǎn)】體液免疫和細(xì)胞免疫的協(xié)調(diào)配合.
【答案】抗原﹣抗體1;新冠病毒抗原;1;陽(yáng)性;T線無(wú)紅色條帶,C線有紅色條帶;保證樣本中病毒RNA均能逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA;復(fù)性;使DNA充分變性,以便引物更好地和模板結(jié)合;①②③⑤
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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