人類酸性成纖維細胞生長因子（aFGF）在轉(zhuǎn)基因植物中的表達量普遍較低，某科研小組通過添加增強子（增強它所調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄頻率）、polyA序列（提高mRNA的穩(wěn)定性）等表達控制元件提高了aFGF基因在紫花苜蓿細胞中的表達量。如圖表示操作的基本過程，質(zhì)粒外面標注了限制酶酶切位點，質(zhì)粒里面標注了相關的結構和基因（其中Kanr代表卡那霉素抗性基因）。請回答問題。
（1）①②過程構建重組質(zhì)粒都需要使用限制酶和DNA連接酶DNA連接酶，限制酶酶XhoⅠ的識別序列是一C↓TCGAG-，aFGF基因被限制酶XhoⅠ切割后形成的黏性末端是
。
（2）圖中質(zhì)粒均未標出aFGF基因兩端的堿基序列aFGF基因兩端的堿基序列復制原點（填結構名稱）；X、Y、Z三個酶切位點中，ZZ的酶切位點與其他兩點不同。
（3）③過程用Ca2+Ca2+預先處理農(nóng)桿菌，可提高質(zhì)粒4的導入率；進行④過程前，需提取農(nóng)桿菌DNA，通過PCR進行基因擴增，鑒定其是否含目的基因，其設計引物的依據(jù)是aFGF基因兩端的堿基序列aFGF基因兩端的堿基序列。
（4）轉(zhuǎn)化后的紫花苜蓿外植體需經(jīng)過脫分化、再分化脫分化、再分化過程才能長成完整植株，若長大后的轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿的aFGF表達量明顯提高，請分析原因：增強子提高了aFGF基因轉(zhuǎn)錄的頻率，植物偏好的密碼子合成的aFGF基因及polyA序列提高了翻譯的效率增強子提高了aFGF基因轉(zhuǎn)錄的頻率，植物偏好的密碼子合成的aFGF基因及polyA序列提高了翻譯的效率。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA連接酶；；aFGF基因兩端的堿基序列；Z；Ca2+；aFGF基因兩端的堿基序列；脫分化、再分化；增強子提高了aFGF基因轉(zhuǎn)錄的頻率，植物偏好的密碼子合成的aFGF基因及polyA序列提高了翻譯的效率
；aFGF基因兩端的堿基序列；Z；Ca2+；aFGF基因兩端的堿基序列；脫分化、再分化；增強子提高了aFGF基因轉(zhuǎn)錄的頻率，植物偏好的密碼子合成的aFGF基因及polyA序列提高了翻譯的效率【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：51引用：3難度：0.3
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6